适用：5μm石蜡组织切片 | 生物实验专用规范操作文档
取出10片待测的5微米厚的石蜡包埋的组织切片
注意：石蜡包埋前，组织样品须用10％中性甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要
放进80℃烘箱，孵育30分钟 选择步骤
室温下静置15分钟 选择步骤
按下表依次放进小染色缸里孵育：
| 染色缸试剂 | 孵育时间 |
|---|---|
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升脱水液A（Reagent B） | 3分钟 |
| xx毫升脱水液B（Reagent C） | 3分钟 |
| xx毫升脱水液C（Reagent D） | 3分钟 |
| xx毫升脱水液D（Reagent E） | 3分钟 |
小心移去切片上的脱水液D（Reagent E）
小心加上xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育5分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升固着液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育48小时或96小时
小心移去固着液（Reagent G）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升媒染液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育5至10分钟
小心移去媒染液（Reagent H）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升梅氏液（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育5分钟
小心移去梅氏液（Reagent I）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育5分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升桔染液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育30至60分钟
小心移去桔染液（Reagent J）
小心加入xx微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升品红液（Reagent K）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育1至5分钟
小心移去品红液（Reagent K）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加入xx微升酸性液（Reagent L）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育2分钟，或直至肌肉呈现红色
注意：可以镜下观察判定终止时间
小心移去切片上的酸性液（Reagent L）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加上xx微升染色液（Reagent M）在切片上，铺满整个切片样品表面
室温下孵育10分钟至2小时，或直至胶原纤维显示蓝色
注意：可以镜下观察判定终止时间
小心移去切片上的染色液（Reagent M）
室温下，小心将切片置入xx毫升清理液（Reagent F）中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液（Reagent F）
小心加上xx微升脱水液B（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面 选择步骤
小心移去切片上的脱水液B（Reagent C）选择步骤
小心加上xx微升脱水液A（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面 选择步骤
小心移去切片上的脱水液A（Reagent B）选择步骤
小心加上xx微升脱蜡液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 选择步骤
小心移去切片上的脱蜡液（Reagent A）选择步骤
放上盖玻片或中性树脂封片
即刻在普通光学显微镜下观察切片结果
|
18918128223