大鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒操作说明书

操作注意事项

1. 试剂盒储存：保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液如有结晶，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 板条保存：实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封保存。

3. 标准品处理：浓度为0的S0号标准品可视为阴性对照或空白，样本结果需乘以5以得到实际浓度。

4. 操作规范：严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行操作。

5. 液体组分：使用前充分摇匀。

需自备的物品

• 酶标仪（450nm）

• 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

• 37℃恒温箱

试剂的准备

• 20×洗涤缓冲液稀释：蒸馏水按1：20稀释。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩干，重复5次。

2. 自动洗板机：每孔注入350μL洗液，浸泡1分钟后洗板5次。

操作步骤

1. 取出板条，室温平衡20分钟后使用，剩余板条密封保存。

2. 设置标准品孔和样本孔，加入标准品和样本。

3. 加入HRP标记的检测抗体，37℃温育60分钟。

4. 洗涤板条5次。

5. 加入底物A、B，37℃避光孵育15分钟。

6. 加入终止液，测定OD值。

结果判断

• 绘制标准曲线，计算样本浓度。

试剂盒性能

• 准确性：标准品线性回归R值≥0.9900。

• 灵敏度：低检测浓度<1.0 ng/ml。

• 特异性：无交叉反应。

• 重复性：变异系数<15%。

• 贮藏：2-8℃，避光防潮。

• 有效期：6个月。

免责声明

1. 仅供研究使用，不得用于临床或人体实验。

2. 违反操作说明的后果由实验者承担。