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主要用途
血液活化凝血因子X(FACTOR Xa)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过多肽化合物底物Benzoyl-Ile-Glu-(γ-OR)-Gly-Arg-pNA,在凝血因子X激活酶存在与否的情况下,受到活化凝血因子X的水解,释放黄色对硝基苯胺,产生吸光峰值的变化,即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种血浆样品(动物、人体等)活化凝血因子X(FACTOR Xa)的活性检测,以及抑制剂筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
凝血因子X(FACTOR X;FX;EC3.4.21.6),又称为斯图亚特因子(Stuart-Prower Factor)或凝血酶原酶(prothrombinase),是一种丝氨酸内肽酶(serine endopeptidase), 存在于血液循环中的凝血蛋白,由45Kd重链和17Kd轻链组成,是凝血瀑布反应中的主要酶之一,即凝血酶(thrombin)通路的第一个成员。凝血因子X在维生素K的参与下,在肝脏合成,半衰期为40至45小时。凝血因子X通过凝血因子IX-凝血因子VIII复合体(内在性因子X酶;intrinsic Xase)和凝血因子VII-组织因子复合体(外在性因子X酶;extrinsic Xase)激活为活化因子X(FACTOR Xa;FXa)。同时可以被鲁塞尔蝰蛇毒X(Russell viper venom;RVV-X)和胰蛋白酶(trypsin)激活。受到蛋白Z依赖性蛋白酶抑制剂(protein Z-dependent protease inhibitor;ZPI)抑制。其功能在于切离凝血因子II,产生活化因子II,即凝血酶(thrombin)。凝血因子X缺陷将导致鼻出血(epistaxis)、关节血肿(hemarthrosis)、胃肠道失血、淀粉样变性(amyloidosis)等。此外活化凝血因子X抑制剂用于抗凝血治疗,包括肝素(heperin)。凝血酶的目标蛋白切离部位为Arg-Thr和Arg-Ile。基于人工合成的多肽化合物底物Benzoyl-Ile-Glu-(γ-OR)-Gly-Arg-pNA(苯酰-异亮氨酰-谷氨酰-γ- OR-甘氨酰-精氨酰对硝基苯胺),在凝血因子X激活酶鲁塞尔蝰蛇毒X(Russel Viper Venom X;RVV-X)存在与否的情况下,受到活化因子X的水解,释放有色对硝基苯胺,在分光光度仪(405nm 波长)下,测定吸光峰值的变化,来定量测定活化凝血因子X的活性。其反应系统为:
Factor Xa
Benzoyl-Ile-Glu-(γ-OR)-Gly-Arg-pNA → Benzoyl-Ile-Glu-(γ-OR)-Gly-Arg-OH + pNA
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