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主要用途
血液凝血酶/活化因子II(THROMBIN/FACTOR IIa)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg-pNA受到凝血酶的水解,释放黄色对硝基苯胺,产生吸光峰值的变化,即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种血浆样品(动物、人体等)凝血酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
凝血酶(THROMBIN;EC3.4.21.5),又称为活化因子II(Activated Factor II;Factor IIa),属于丝氨酸蛋白酶,存在于血液循环中的凝血蛋白。其原酶分子量是72kd,由活化因子X(Activated Factor X;Factor Xa)所切离产生的活化凝血酶分子量是36kd。其功能在于将血浆中可溶性纤维蛋白原(fibrinogen)转化为不溶性纤维蛋白凝块(fibrin clot),活化因子XI、V、VIII,XIII等,以及促进血小板聚集等凝血机制方面发挥重要作用。凝血酶影响一系列正常和病理反应,包括炎症、组织修复、胚胎形成、血管形成、肿瘤浸润等。凝血酶基因突变将导致血栓形成(thrombosis)。凝血酶的目标蛋白切离部位为Leu-Val-Pro-Arg-Gly-Ser。凝血酶的抑制剂是苯甲基磺酰氟(Phenylmethanesulfonyl fluoride;PMSF)。基于人工合成的多肽化合物底物H-D-Phe-Pip- Arg-pNA(HD-苯丙氨酰- pipecolyl-精氨酰对硝基苯胺)受到凝血酶的水解,释放有色对硝基苯胺,在分光光度仪(405nm 波长)下,测定吸光峰值的变化,来定量测定凝血酶的活性。其反应系统为:
Thrombin
H-D-Phe-Pip- Arg-pNA → H-D-Phe-Pip- Arg-OH + pNA
(黄色)
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